Как да отгледате гъби от тъканна култура: пълно ръководство стъпка по стъпка

Гъбите могат успешно да се клонират чрез вземане на тъканна култура и нейното отглеждане в стерилна хранителна среда, приготвена от картофено-декстрозен агар. Тази среда осигурява всички необходими хранителни вещества за развитието на тъканта. За целта трябва да се отдели стерилен къс от вътрешността на здрава гъба-донор. Процесът е подобен на вземането на резник от храст и последващото му вкореняване — получените гъби ще бъдат напълно идентични с родителския екземпляр.

Необходими материали

• Около 450 г картофи
• Около 28 г агар
• 2 супени лъжици захар
• Тенджера и котлон
• Таймер
• Вода за покриване на картофите + около 1 литър чешмяна вода
• Мерителна чашка и мерителни лъжици
• Нож и вилица
• Цедка
• Алуминиево фолио
• Термостойка стъклена купа (тип Pyrex)
• 9 епруветки с капачки
• Остър скалпел или прецизен нож
• Запалка и спиртна лампа
• 3 празни кутии от супа
• 3 празни кутии от риба тон
• Рукавица за фурна
• Лепяща лента и маркер
• Белина, пулверизатор и хартиени кърпи
• 1 прясна гъба

Съвет: Ако разполагате с тенджера под налягане, той е незаменим за успешната стерилизация на агара и епруветките.

Етап 1: Пригответе агаровия гел

Стъпка 1: Сварете картофите

Нарежете картофите на парчета, без да ги белите. Поставете ги в тенджерата, залейте с вода, така че да са напълно покрити, и варете на средно силен огън, докато омекнат напълно.

Стъпка 2: Пригответе сместа

Прецедете картофите и изсипете полученията течност в термостойката стъклена купа. С помощта на вилицата разбъркайте в нея около 28 г агар и 2 супени лъжици захар. Добавете около 1 литър вода към сместа и разбъркайте добре.

Стъпка 3: Стерилизирайте агара

Притиснете плътно лист алуминиево фолио върху купата, за да предпазите съдържанието. Налейте 1 чаша вода в тенджерата под налягане, поставете вътре купата с агаровата смес и затворете капака. Гответе на среден огън в продължение на 20 минути при 15 psi. Стартирайте таймера едва когато тенджерата достигне 15 psi. След това оставете уреда да се охлади около час, преди да го отворите.

Етап 2: Напълнете епруветките

Стъпка 4: Разпределете сместа

Подредете чистите кутии от супа и риба тон на ред — те ще служат като опори, които държат епруветките под наклон. Изсипете агаровата смес в мерителната чашка и напълнете всяка епруветка до една трета от обема ѝ. Поставете капачките леко или покрийте отворите с фолио. Разпределете по три напълнени епруветки във всяка кутия от супа. Налейте 1 чаша вода в тенджерата под налягане, поставете кутиите с епруветките вътре и закрепете плътно капака.

Стъпка 5: Стерилизирайте епруветките

Стерилизирайте епруветките в тенджерата под налягане при 15 psi в продължение на 25 минути. Стартирайте таймера, когато уредът достигне необходимото налягане. След това оставете тенджерата да се охлади на котлона за един час.

Стъпка 6: Охладете агара под наклон

Отворете тенджерата и внимателно извадете горещите епруветки с рукавица за фурна. Поставете по три епруветки във всяка кутия от риба тон, така че да стоят под правилния наклон докато се охладят — така агарът ще се втвърди като наклонена повърхност, удобна за работа. Затегнете капачките окончателно, след като агарът се охлади и превърне в гел. Покрийте всяка кутия с алуминиево фолио, за да предпазите епруветките от прах.

Етап 3: Подгответе пробата от гъбата

Стъпка 7: Обеззаразете работната повърхност

Напръскайте кухненското бюро с белина, разредена във вода, и го избършете с хартиени кърпи. Работете сутрин, за да избегнете течение и прах във въздуха. Оттук нататък действайте бързо и уверено.

Стъпка 8: Подгответе инструментите

Подредете епруветките върху чистата маса заедно със скалпела, гъбата и запалената спиртна лампа. Четвъртата кутия ще използвате като поставка, върху която да слагате пламъчно стерилизирания скалпел, докато той остава близо до пламъка.

Стъпка 9: Дръжте епруветката правилно

Отворете внимателно една епруветка и я задръжте между средния и безименния пръст на лявата си ръка, ако сте десничар. Капачката дръжте между малкия и безименния пръст, за да имате свободна работна ръка.

Стъпка 10: Вземете тъканната проба

Разчупете гъбата наполовина, като внимавате вътрешният срез да не докосне масата. Загрейте острието на скалпела в пламъка на спиртната лампа, след което отрежете малко парченце от вътрешната плът на гъбата и го поставете в епруветката върху агара. Бързо затворете капачката и приберете епруветката с новосъздадената тъканна култура при останалите. Винаги дръжте острието близо до пламъка, когато не го използвате. Повторете процедурата за останалите осем епруветки.

Стъпка 11: Етикетирайте и съхранявайте

Залепете лепяща лента около дъното на всяка капачка и запишете с маркера датата и вида на гъбата. Съхранявайте подготвените епруветки в тъмна стая при температура между 13 и 21 °C (55–70 °F), за да може мицелът да покълне и да обрасне агаровата среда. След няколко седмици ще забележите бял, пухкав мицел — знак, че клонирането е успешно.